
MTT 元老、CCK-8 新贵、ATP 实力派...谁才是 C 位? MCE 上新 ATP 发光法细胞活力检测试剂盒 (以下简称 ATP 发光法)配资平台app,简单、灵敏、快速的均质检测方法,堪称细胞活力检测的 "金标准"!
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细胞活力检测大PK
常用的细胞活力检测主要有 MTT、CCK8、Cell-ATP (CTG) 检测法等。首先,我们先来简单看下这些检测方法的原理、操作流程及优缺点~
方法 1:MTT 法
MTT法:又称 MTT 比色法。
原理
活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性 MTT 还原为不溶于水的蓝紫色结晶甲臜 (Formazan) 并沉积在细胞中,但死细胞无此功能,后经 DMSO 溶解,于 490 nm 处测定吸光值便可间接反应细胞活力。
流程
展开剩余92%MTT 作为“元老”级别的检测方法,虽然“老练”,Paper 无数,但麻烦是真麻烦。当然,该方法除去操作步骤耗时以外,生成的 Formazan 是不溶于水的,需经 DMSO 溶解后才能检测,增加了工作量的同时仍不能保证测定结果的准确性,且该溶剂对人体具有明显毒性。
方法 2:CCK8 法
相较于 MTT,CCK8 法无论是操作步骤还是检测时间都优化了很多!
原理
CCK8 是一种基于 WST-8 而广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速、高灵敏度、无放射性的比色检测方法(可看往期推文 CCK-8,让细胞活性检测 So Easy!)。
流程
具体操作如下图所示: 1) 96 孔板中每孔加入 10 μL 的 CCK-8 溶液 (注意不要产生气泡); 2) 培养箱培养 1-4 h (避免放在培养箱边缘位置); 3) 酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
案例
不同浓度 KN93 和 Gemcitabine 对 CCLP1 cell 活力的影响
细胞系: CCLP1 cells 培养条件: DMEM+10同花配资提示:文章来自网络,不代表本站观点。